Biopredic International—組織樣品及細胞株
Biopredic International是一家成立于1993年的法國高科技生物制品公司,其核心是基于法國國家健康與醫學研究所的技術轉讓。該公司是致力于毒理學和肝臟病學領域的產品研發與供應,是HepaRG™(法國國家健康與醫學研究所的人類肝干細胞株)的*授權公司,還參與多個歐洲國家科研項目。
Biopredic公司zui初的產品是冷凍保存原代肝細胞,進而迅速延伸至細胞分離以及供應新鮮的和凍存的人類和動物生物制品,包括組織、原代細胞系和相關試劑。今天,Biopredic的產品已經超過400種,廣泛服務于學術研究和工業產品開發(包括藥物研發、化妝品和化學工業),包括為藥物的體外實驗提供人類和動物的細胞或組織及相關試劑,適用于生物分析、生物滲透、大分子轉運、免疫、代謝、毒理和毒性以及遺傳毒性學等研究。
除了在法國生產基地(總部),Biopredic公司還在意大利(都靈、米蘭)和美國(密蘇里州)設有分公司,銷售Biopredic品牌的產品及貼牌生產的生物制品。
Biopredic公司的主要產品介紹:
概述:Biopredic提供人與動物的多種肝臟產品,包括組織和肝細胞,人肝干細胞系HepaRG™,和Silensomes™。其中人類肝臟樣本是從肝病手術的患者采集的,整個收集,加工和銷售給研究機構均符合法國法律和倫理原則。而所有的動物生物材料是從有資質的機構獲取,肝臟樣品從健康成年實驗室動物收集,并附有由獸醫提供的健康證書以保證供體動物是健康的。
肝臟組織亞細胞組分分離流程
原代肝細胞是生物研究、新藥研發、藥理學和毒理學研究的理想體外肝模型。Biopredic提供范圍廣泛的人類及動物新鮮和冷凍的肝細胞。因為新鮮分離的肝細胞更直接地反映了在體內的情況,因此是評估測試化合物的體外肝臟代謝和毒性的理想體外模型。
新鮮的人肝細胞產品包括:
(1)懸浮培養的肝細胞:
用于短時間使用的代謝研究等實驗(zui長可達4小時),為了提供新鮮分離的懸浮培養人肝細胞, Biopredic公司從人新鮮肝組織取樣并迅速懸浮于Biopredic*的改良低溫保存介質中,可保持在裝運期間(至多48小時)細胞活力與功能活性。
產品特色與優勢:
•專有生產工藝確保了的新鮮肝細胞;
•優化的低溫運輸條件;
•保持細胞活力,穩定的蛋白和代謝酶的表達水平;
•懸浮或貼壁培養的細胞均有著良好的操作靈活性;
•每批次產品均有鑒定詳細的報告;
•標有一般患者信息(如年齡,性別,種族,健康狀況,血清學等)。
懸浮培養肝細胞的鑒定報告內容:
•分離和冷藏運輸后的細胞存活度;冷藏后的細胞產量和貼壁性能,運輸前后的細胞形態;
• CYP1A2/3A4/2B6/2D6/2C19混合底物測試I期藥物代謝酶活性;
•第二階段藥物代謝酶:UGT1A1/ UGT1A6/ UGT1A9/ UGT2B15/ SULT1A1/ SULT1A3/4/ SULT1E1底物測試II期藥物代謝酶活性;
•血清學等控制數據。
懸浮培養肝細胞的運輸控制:
新鮮分離的肝細胞懸浮于一個改良的低溫介質中,然后分裝至凍存管(1ml/瓶,至少含有一千萬細胞)。然后當天或次日進行低溫運輸(2-8℃)。在這種運輸模式下,肝細胞的存活能力和貼壁性能均得到很好的保持(4℃至少48小時)。
(2)貼壁培養的肝細胞:
可用于長時間的代謝研究(zui多3天),Biopredic將新鮮分離的高活性肝細胞根據客戶需求的密度種植于膠原包被的培養器皿中,得到的單層培養原代肝細胞。貼壁隔夜后,培養基被更換為短期(≤ 3 days)或長期培養(≤ 6 days)液中,肝細胞可維持其分化表型至少一周。短期和長期培養肝細胞均包含了所有主要的一期和II期酶,以及其研究相關潛在藥物的整個基因調控通路。
產品特色與優勢:
•多格保護的貼壁細胞,可根據客戶需求定制;
•細胞具有更高的存活能力及單層內細胞融合;
•主肝細胞的藥物代謝酶,輔因子和細胞膜上的受體具有高水平表達;
•短期或長期培養可選使應用更靈活;
• BioprediSEALOVAC技術的包裝和運輸條件確保產品優良品質;
•每批次產品均有鑒定詳細的報告;
•標有一般患者信息(如年齡,性別,種族,健康狀況,血清學等)。
貼壁培養肝細胞的鑒定報告內容:
•分離和接種后的細胞活力及細胞培養周期;
•顯微鏡下的細胞形態和融合狀態;
• CYP1A2/3A4/2B6/2D6/2C19混合底物測試I期藥物代謝酶活性;
•第二階段藥物代謝酶:UGT1A1/ UGT1A6/ UGT1A9/ UGT2B15/ SULT1A1/ SULT1A3/4/ SULT1E1底物測試II期藥物代謝酶活性;
•血清學等控制數據。
貼壁培養肝細胞的運輸控制:
根據客戶需要預充短期或長期培養液至多孔培養板,以及添加或不添加酚紅,然后使用Biopredic的Sealovac™技術為貨物在室溫(18-30°C)下包裝,這些運輸準備程序可確保包裝的單層貼壁細胞的細胞質量和功能維持至少48小時。
Biopredic提供多種從不同的動物獲得新鮮肝細胞,包括大鼠,小鼠,倉鼠,兔子,食蟹猴,犬,小型豬和其他物種。可以從單一動物肝供體(如小鼠,大鼠,狗,猴,兔或倉鼠)或幾種動物的混合肝細胞。所有的嚙齒動物的肝細胞來源動物均嚴格遵守歐盟動物飼養標準。其他動物也遵守所有的道德和法律規定。動物肝細胞產品也包括懸浮和貼壁培養兩種。
懸浮培養肝細胞的特色與優勢:
貼壁培養肝細胞的特色與優勢:
• 多格保護的貼壁細胞,可根據客戶需求定制;
• 細胞具有更高的存活能力及單層內細胞融合;
• 主肝細胞的藥物代謝酶,輔因子和細胞膜上的受體具有高水平表達;
• 短期或長期培養可選使應用更靈活;
• BioprediSEALOVAC技術的包裝和運輸條件確保產品優良品質;
• 每批次產品均有鑒定詳細的報告;
Biopredic公司在冷凍保存人類和動物的肝細胞領域有著超過20年的經驗,可提供的懸浮(S級)或可貼壁的肝細胞,其中貼壁肝細胞包括:
• 凍存的P級人肝細胞()
• 凍存的I級誘導人肝細胞()
•凍存的即用型肝細胞(無需sipn的NS級)
•凍存立體培養的肝細胞
部分使用Biopredic公司肝細胞的文獻:
1、Comparative localization and functional activity of the main hepatobiliary transporters in HepaRG cells and primary human hepatocytes.
2、Bachour-El Azzi P, Sharanek A, Burban A, Li R, Le Guével R, Abdel-Razzak Z, Stieger B, Guguen-Guillouzo C, Guillouzo A Toxicol Sci., Feb 2015
3、Nigramide J is a novel potent inverse agonist of the human constitutive androstane receptor Kanno Y, Tanuma N, Yatsu T, Li W, Koike K, Inouye Y PRP, Nov 2014
4、Dual Effects of Ketoconazole cis-Enantiomers on CYP3A4 in Human Hepatocytes and HepG2 Cells Novotna A, Krasulová K, Bartonková I, Korhonová M, Bachleda P, Anzenbacher P, Dvorák Z Plos One, Oct 2014
5、Gold(I) Complexes of 9-Deazahypoxanthine as Selective Antitumor and Anti-Inflammatory Agents Vanco J, Gáliková J, Ho?ek J, Dvo?ák Z, Paráková L, Trávní?ek Z Plos One, Oct 2014
6、Utility of cryopreserved hepatocytes suspended in serum to predict hepatic clearance in dogs and monkeys Shibata Y, Kuze J, Chiba M Drug Metab Pharmacokinet, Sep 2014
7、Histone Deacetylase Inhibitor Valproic Acid Promotes the Differentiation of Human Induced Pluripotent Stem Cells into Hepatocyte-Like Cells Kondo Y, Iwao T, Yoshihashi S, Mimori K, Ogihara R, Nagata K, Kurose K, Saito M, Niwa T, Suzuki T, Miyata N, Ohmori S, Nakamura K, Matsunaga T Plos One, Aug 2014
8、Omeprazole and Lansoprazole Enantiomers Induce CYP3A4 in Human Hepatocytes and Cell Lines via Glucocorticoid Receptor and Pregnane X Receptor Axis Novotna A, Dvorak Z Plos One, Aug 2014
9、Differential Effects of Omeprazole and Lansoprazole Enantiomers on Aryl Hydrocarbon Receptor in Human Hepatocytes and Cell Lines Novotna A, Srovnalova A, Svecarova M, Korhonova M, Bartonkova I, Dvorak Z Plos One, Jul 2014
10、Enantiospecific Effects of Ketoconazole on Aryl Hydrocarbon Receptor Novotna A, Korhonova M, Bartonkova I, Soshilov AA, Denison MS, Bogdanova K, Kolar M, Bednar P, Dvorak Z Plos One, Jul 2014
更多參考文獻請訪問:http://www.biopredic。。com/index.php?rub=hepatocytes_resources
概述:該細胞株zui初分離自一位膽管癌患者肝臟組織,經過INSERM和Biopredic的科學家們鑒定了其*性,并確定*培養條件以維持其增長或分化,可分化為成人肝細胞。HepaRG™細胞有著穩定的核型和特征,是可經歷多次傳代而不發生變異的永生細胞株,因此可用于研究肝細胞的信號通路及其調控機制。
HepaRG™的特點與優勢:
1、高度穩定:
可持續傳代超過20代,并保持核型穩定及細胞高度均一性(未分化的表型及早期肝細胞功能)
(2)可無限增殖:
其增殖周期約24小時, 以2.7x104 cells/cm²密度接種,每兩周需傳代一次,持續至少20代。
(3).擁有完整的向肝細胞分化功能
HepaRG™ 細胞表達所有正常的成熟肝細胞主要特征,如下圖所示:
(4).表達干細胞特征包括轉分化能力
表達胚胎干細胞及肝肝細胞的多種標志物,如OCT3/4、NCAM、ABCG2、 CK18、 and CK19、CD34、Thy1、 Flt-3、c-Kit、 IL-3R及LIF-R
細胞株維持操作步驟:
a、0.05%胰蛋白酶溶液消化3-5分鐘;
b、將細胞收集到含胰島素(4μg的/ ml)、(50μM)、10%胎牛血清的William’S E培養基中;
c、細胞計數后,以20x103/平方厘米接種于相同的培養基,在37℃的CO 2培養箱中培養,每2-3天換液一次,細胞的增殖活性可持續5-6天,2周后高度融合。
d、融合的HepaRG®即可用于再次傳代,也可用分化程序(加入1.7%DMSO)。
主要應用:
1、Expression and Functionality of Toll- and RIG-like receptors in HepaRG Cells. Luangsay S, Ait-Goughoulte M, Michelet M, Floriot O, Bonnin M, Gruffaz M, Rivoire M, Fletcher S, Javanbakht H, Lucifora J, Zoulim F, Duran D J Hepatol., Jul 2015
2、HBx relieves chromatin-mediated transcriptional repression of hepatitis B viral cccDNA involving SETDB1 histone methyltransferase. Rivière L, Gerossier L, Ducroux A, Dion S, Deng Q, Michel ML, Buendia MA, Hantz O, Neuveut C J Hepatol., Jul 2015
3、Applications of human hepatitis B virus preS domain in bio- and nanotechnology. Toita R, Kawano T, Kang JH, Murata M World J Gastroenterol., Jul 2015
4、Hepatic TLR4 Signaling in Obese NAFLD Sharifnia T, Antoun J, Verriere TG, Suarez G, Wattacheril J, Wilson KT, Peek RM Jr, Abumrad NN, Flynn CR Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol., Jun 2015
5、A four-organ-chip for interconnected long-term co-culture of human intestine, liver, skin and kidney equivalents Maschmeyer I, Lorenz A, Schimek K, Hasenberg T, Ramme A, Hübner J, Lindner M, Drewell C, Bauer S, Thomas A, Sisoli Sambo N, Sonntag F, Lauster R, Marx U Royal Society of Chemical, May 2015
6、The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture. Materne EM, Maschmeyer I, Lorenz AK, Horland R, Schimek KM, Busek M, Sonntag F, Lauster R, Marx U J Vis Exp., May 2015
7、Viral Entry of Hepatitis B and D Viruses and Bile Salts Transportation Share Common Molecular Determinants on Sodium Taurocholate Cotransporting Polypeptide Yan X, Wang J, Zhu L, Lowrey JJ, Zhang Y, Hou W, Dong J, Du Y Lab Chip., May 2015
8、Drug biokinetic and toxicity assessments in rat and human primary hepatocytes and HepaRG cells within the EU-funded Predict-IV project.
Mueller SO, Guillouzo A, Hewitt PG, Richert L Toxicol In Vitro, May 2015
9、Three-dimensional (3D) spheroid cultures improve the metabolic gene expression profiles of HepaRG cells. Takahashi Y, Hori Y, Yamamoto T, Urashima T, Ohara Y, Tanaka H Biosci Rep., May 2015
10、Multiparametric assay using HepaRG cells for predicting drug-induced liver injury. Tomida T, Okamura H, Satsukawa M, Yokoi T, Konno Y Toxicol Lett., May 2015
11、Allopurinol and 5-aminosalicylic acid influence thiopurine-induced hepatotoxicity in vitro. Broekman MM, Roelofs HM, Wong DR, Kerstholt M, Leijten A, Hoentjen F, Peters WH, Wanten GJ, de Jong DJ Cell Biol Toxicol., May 2015
12、Time course of acetaminophen-protein adducts and acetaminophen metabolites in circulation of overdose patients and in HepaRG cells.
Xie Y, McGill MR, Cook SF, Sharpe MR, Winefield RD, Wilkins DG, Rollins DE, Jaeschke H Xenobiotica, Apr 2015
13、Hepatotoxicity of piperazine designer drugs: comparison of different in vitro models. Dias-da-Silva D, Arbo MD, Valente MJ, Bastos ML, Carmo H Toxicol. In Vitro, Apr 2015
14、The aryl hydrocarbon receptor-dependent disruption of contact inhibition in rat liver WB-F344 epithelial cells is linked with induction of survivin, but not with inhibition of apoptosis. Svobodová J, Kabátková M, merdová L, Brenerová P, Dvo?ák Z, Machala M, Vondrá?ek J Toxicology, Apr 2015
15、BK/TD models for analyzing in vitro impedance data on cytotoxicity.
Teng S, Barcellini-Couget S, Beaudouin R, Brochot C, Desousa G, Rahmani R, Pery A Toxicol Lett., Mar 2015
16、Forced expression of PDX-1 gene makes hepatoma cells to acquire glucose-responsive insulin secretion while maintaining hepatic characteristic. Hashimoto H, Higuchi Y, Kawai K Cell Mol Biol, Mar 2015
17、Inflammation-Associated microRNA-130b Downregulates Cytochro- me P450 Activities and Directly Targets CYP2C9. Rieger JK, Reutter S, Hofmann U, Schwab M, Zanger UM Drug Metabolism Dispos., Mar 2015
18、Prediction of Gestational Age-Dependent Induction of In Vivo Hepatic CYP3A Activity Based on HepaRG Cells and Human Hepatocytes. Zhang Z, Farooq M, Prasad B, Grepper S, Unadkat JD Drug Metabolism Dispos., Mar 2015
19、Progenitor cell expansion and impaired hepatocyte regeneration in explanted livers from alcoholic hepatitis Dubuquoy L, Louvet A, Lassailly G, Truant S, Boleslawski E, Artru F, Maggiotto F, Gantier E, Buob D, Leteurtre E , Cannesson A, Dharancy S, Moreno C, Pruvot FR, Bataller R, Mathurin P Hepatology, Mar 2015
20、Interleukin 6 inhibits HBV entry through NTCP down regulation.
Bouezzedine F, Fardel O, Gripon P Virology, Mar 2015
(5)、SILENSOMES
Silensomes™是CYP酶不可逆抑制的人肝細胞微粒體,可用于直接定量和預測CYP酶在藥物代謝中的作用,是一個即用型的PHENOTYING研究體外模型。
Silensomes™細胞株的特色和優勢:
CYPs酶被不可逆抑制,是研究藥物間相互作用的理想細胞株;
單一的CYP模型試驗即可替代一組體外實驗;
可定量;
高特異性、穩定性和可預測性;
更貼近體內狀況。
注:Biopredic建議在HepaRG™細胞換液、接種、培養、維持、消化等過程均使用本公司的試劑和添加劑。
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Biopredic供應多種人類和動物來源的皮膚產品,廣泛應用于:藥物滲透、皮膚刺激、毒性試驗、代謝學研究及皮膚來源細胞分離等研究領域。人源皮膚制品均采集自經歷外科整形手術的患者,整個采集、處理及銷售程序均遵循相關倫理規范標準。
1、人皮膚組織:
該產品系列包括:全厚的背部、胸部、頭部、上下肢等處皮膚,規格從5 到 40 mm直徑的片狀,部分樣品的被切除,厚度從300到700 µm.
產品優勢:
皮膚成纖維細胞分泌皮膚的胞外基質,參與再生和修復等多種生理過程,可廣泛應用于胞外基質蛋白組成、創傷修復、皮膚治療/模型、化妝品測試、膠原代謝等毒理、藥理和新藥研發等研究領域。
人角化細胞是的必要結構組分,主要負責皮膚防御的功能,可應用于皮膚治療/模型、化妝品檢測等研究。
皮膚亞細胞組分分離提取流程
該產品系列包括人和動物毛發、指甲等皮膚附屬產品。
Biopredic 提供人脂肪組織產品用于代謝等研究,包括新鮮或凍存的皮下脂肪、脂肪前體細胞。
.1、皮下脂肪.
產品優勢:
Biopredic供應特定的脂肪前體細胞培養液、分化培養液產品。
1、Three-Dimensional Expansion Using Plasma-Medium Gel with Fragmin/Protamine Nanoparticles and FGF-2 to Stimulate Adipose-Derived Stromal Cells and Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stem CellsKishimoto S, Ishihara M, Mori Y, Takikawa M, Sumi Y, Nakamura S, Sato T, Kiyosawa T BioResearch, Dec 2012
2、Insulin Induces REDD1 Expression through Hypoxiainducible Factor 1 Activation in AdipocytesRegazzetti C, Bost F, Le Marchand-Brus Y, Tanti JF, Giorgetti-Peraldi S J Biol Chem, Nov 2010
Biopredic供應人和動物體液及相關細胞、亞細胞結構產品。
該產品系列包括來源于健康供體的人全血、血漿、血清、血細胞層、紅細胞層及脂蛋白產品,所有產品均 HBsAg, HIV1/2、HCV陰性,其它血清學檢測可根據客戶需要進行。動物血液產品均為具備相關資質的單位采集生產,來源為健康的實驗動物,并附有健康檢驗報告。
產品優勢:
該系列產品可應用于抗原呈遞、表型研究、藥物對細胞因子分泌的影響等研究,每批血細胞均保證復蘇后85%以上的活性,并經流式細胞術檢測確定其表面抗原表達穩定。 該系列產品包括外周血單核細胞(PBMC)和外周血淋巴細胞(PBL) 。
3、其它體液產品:包括膽汁、胃液、腸液、乳汁、唾液、尿液及糞便等
該產品系列包括新鮮或凍存的腸組織及腸亞細胞產品:
產品優勢:
腸組織亞細胞組分分離提取流程?
產品優勢:
腎臟亞細胞組分分離提取流程
Biopredic 供應的新鮮人胎盤及非洲蟾蜍卵母細胞(及培養液)。
Biopredic供應的人和動物新鮮及凍存呼吸系統組織樣品,包括:支氣管、鼻息肉、肺臟組織、肺臟組織亞細胞成分(包括勻漿液、S9 片段、微粒體及胞漿溶液)。
產品優勢:
肺臟亞細胞組分分離提取流程
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