天天摸夜夜摸成人免费视频-天天摸夜添狠狠添高-天天摸天天做天天爽-天天摸天天做-国产成人啪午夜精品网站男同-国产成人女人在线视频观看

您好!歡迎訪問上海起發實驗試劑有限公司網站!
全國服務咨詢熱線:

15921799099

當前位置:首頁 > 技術文章 > 如何降低ELISA的背景

如何降低ELISA的背景

更新時間:2013-10-16      點擊次數:2241

ELISA實驗的原理似乎很 簡單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。然而,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能毀了整個實驗。在實驗 結束時,我們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于結果的信噪比。背景噪音會影響您對結果的判斷。如何降低ELISA的背景,下面有一些 tips。

洗滌很重要

洗滌步驟看似很無聊,其實很重要,因為如果未結合的材料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反應。如果背景過高,而您懷疑洗滌不夠時,可以嘗試增加洗滌次數。

 

封閉更關鍵

封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。您當然也希望抗體只與目的蛋白結合吧。如果您的背景過高,懷疑封閉不充分,那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當延長封閉時間。

如果您一直被背景問題所困擾,那么也許您該花些時間來優化封閉液。這可能需要時間,但也 是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、您的抗體和檢測試劑。 好的封閉液應降低非特異性結合,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發生相互作用。

zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩定,在去除洗滌過程中的 一些非特異結合上很有用。但它們只在存在時起作用,因為很容易被洗掉。因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請勿使用高濃度(正常濃度為 0.01-0.1%),它會降低特異結合,產生假陰性。另一個選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,后者可協助洗滌過程中的封閉。

蛋白封閉液則有所不同,是*的。它們與開放位點結合并封閉,同時穩定與微孔板結合的抗 原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不 過,它的缺點在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個問題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。

上海起福生物科技有限公司
:楊建輝

辦公:
*8006

:
:http://www.tjhyjtls.cn/
地址:上海市浦東新區繡川路561號1102室

抗體濃度須優化

我們通常會依照師兄師姐留下來的操作步驟,但是如果試劑稍有不同,則可能需要優化抗體的量。記住,非特異的抗體結合會增加背景。為了防止這一點,切勿使用過多的一抗或二抗。

 

檢測試劑要適量

另一點也很顯而易見:切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高,或者未正確稀釋,則會導致高背景。也不要顯色過度,如有必要,優化一下何時應加入終止液。

如果您的ELISA不幸地遇到了高背景,那么也無需太擔心,依次查看ELISA系統中的組分,并排除可能存在的問題。悉心優化,相信很快就會有漂亮的結果。

上海起發實驗試劑有限公司
地址:上海浦東川沙鎮川沙路6619號上海起發實驗試劑有限公司
郵箱:xs1@78bio.com
傳真:021-50724961
關注我們
歡迎您關注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關注我們的微信公眾號
了解更多信息
主站蜘蛛池模板: 精品国语_高清国语自产| 91国语精品自产拍在线观看一| 久久精品视频99| 国产一级片网址| a站在线免费观看| 额去鲁免费视频在线观看| 国产视频黄| 一区国严二区亚洲三区| 日韩中文字幕视频在线| 91cao| lu99| 青青青国产依人精品视频| 亚洲人与日本人jjzz| 亚洲国产欧美国产第一区二区三区| 国产成人免费在线观看| 欧美日韩综合视频| 欧美日本中文字幕| 青青青视频免费线看 视频| 草草影院欧美| 人人干国产| 一级成人a毛片免费播放| 99精品视频在线免费观看| 日本精品久久久久中文字幕8| 日韩精品成人在线| 草草国产成人免费视频| 免费中文字幕在线国语| 欧美在线观看一区二区| 天天干天天插天天操| 成人免费大片黄在线观看com| 精品一区二区三区水蜜桃| 日韩精品一区二区三区在线观看l| 欧美日韩永久久一区二区三区| 国产一级特黄高清免费大片dvd| 亚洲免费精品视频| 99热影视| 日韩中文字幕高清在线专区| 日韩精品在线播放| 久久精品亚洲热综合一本奇米| 中文字幕在线二区| 青青草国产青春综合久久| 黄色毛片网|