乳腺癌MCF-7細(xì)胞株裸鼠移植瘤模型:用含50U/ml慶大霉素、15%滅活小牛血清和10p-g/ml人胰島素的RPMI1640培養(yǎng)液,在370C和5%C02充分濕化條件下培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7備用。選30天齡BALB/cA雌性裸小鼠,體重為15~17g。每周2次腹腔注射苯甲酸雌二醇10mg/kg,持續(xù)2周。將人乳腺癌MCF-7細(xì)胞5×107接種于雌二醇處理過的裸小鼠右側(cè)腋窩皮下,建成人乳腺癌MCF-7裸小鼠移植瘤,接種后隔天腹腔注射苯甲酸雌二醇10mg/kg。移植瘤在裸小鼠體內(nèi)持續(xù)傳3代后,用于體內(nèi)抗腫瘤試驗。取生長旺盛期的MCF-7瘤組織剪切成1·51T1II13左右,在無菌條件下,接種于雌二醇處理過的裸小鼠右側(cè)腋窩皮下。接種后隨機分籠。實驗期間仍隔天腹腔注射苯甲酸雌二醇。
人乳腺癌MDA-MB-435細(xì)胞株裸鼠移植瘤模型:用含50U/ml慶大霉素、10%滅活小牛血清MEM培養(yǎng)液,在37℃和5%C02充分濕化條件下培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-435備用。采納BALB/C雌性裸小鼠,SPF級,體重20±2g;35~40日齡,取對數(shù)生長的體外培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-435,細(xì)胞濃度調(diào)整為1×107/ml。無菌條件下,將MDA-MB-435人乳腺癌細(xì)胞接種于裸小鼠左側(cè)第二乳頭的月旨肪墊,接種量為0.Iml/只(細(xì)胞數(shù)為1×106/只)。2周后皮下明顯觸及腫塊生長時隨機分組。給藥時間為10周,停藥后3天將動物脫頸正法。
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