在基因治療、細(xì)胞治療以及基礎(chǔ)生物學(xué)研究領(lǐng)域，病毒載體作為一種重要的基因遞送工具，其轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的高低直接影響著實(shí)驗(yàn)的成敗與治療效果。然而，提高病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)效率并同時(shí)確保細(xì)胞的健康與功能，一直是科研人員面臨的重大挑戰(zhàn)。AlstemBio 的 ViralBoost Reagent 應(yīng)運(yùn)而生，憑借其配方與性能，成功攻克這些難點(diǎn)，為科研與臨床應(yīng)用帶來(lái)新的曙光。作為AlstemBio公司的中國(guó)授權(quán)代理，上海起發(fā)強(qiáng)烈推薦其ViralBoost Reagent產(chǎn)品。

直擊傳統(tǒng)病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)痛點(diǎn)

轉(zhuǎn)導(dǎo)效率提升難題的有效攻克

傳統(tǒng)的病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中，病毒與細(xì)胞表面的結(jié)合效率有限，且部分病毒在進(jìn)入細(xì)胞后可能面臨內(nèi)體逃逸障礙等問(wèn)題，導(dǎo)致大量病毒無(wú)法有效將基因遞送至細(xì)胞核，從而使得轉(zhuǎn)導(dǎo)效率低下。ViralBoost Reagent 通過(guò)特殊的分子機(jī)制，能夠顯著增強(qiáng)病毒載體與細(xì)胞表面受體的結(jié)合能力。它含有特定的功能性分子，這些分子可以與細(xì)胞表面的某些蛋白或糖基化位點(diǎn)相互作用，引導(dǎo)病毒載體更精準(zhǔn)地錨定在細(xì)胞表面，增加病毒與細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)。同時(shí)，該試劑還能協(xié)助病毒突破內(nèi)體逃逸的障礙，促進(jìn)病毒基因組從內(nèi)體中釋放并進(jìn)入細(xì)胞核，從而大幅提高了病毒載體的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，使用 ViralBoost Reagent 后，慢病毒、腺病毒等常見(jiàn)病毒載體對(duì)多種細(xì)胞系的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率可提升數(shù)倍甚至數(shù)十倍，為基因治療和細(xì)胞治療提供了更強(qiáng)大的基因遞送保障。

細(xì)胞毒性與細(xì)胞功能影響難題的精妙解決

在嘗試提高病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的過(guò)程中，一些輔助試劑或處理方法往往會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性，影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)、代謝和功能，甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。這對(duì)于需要維持細(xì)胞活性和功能完整性的實(shí)驗(yàn)和治療應(yīng)用來(lái)說(shuō)是一個(gè)嚴(yán)重的問(wèn)題。AlstemBio 的 ViralBoost Reagent 采用溫和且生物相容性良好的配方，在顯著提升轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的同時(shí)，對(duì)細(xì)胞的毒性極小。經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的細(xì)胞毒性測(cè)試，在有效提升轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞的存活率、增殖能力以及關(guān)鍵生物學(xué)功能均未受到明顯影響。例如，在對(duì)干細(xì)胞進(jìn)行基因轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)，使用 ViralBoost Reagent 不僅能夠高效地將目的基因?qū)敫杉?xì)胞，而且干細(xì)胞依然能夠保持其多能性和分化潛能，為干細(xì)胞治療相關(guān)研究提供了可靠的技術(shù)支持。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

★ 顯著提高病毒產(chǎn)量

ViralBoost Reagent是一種新型的小分子混合物，能夠在轉(zhuǎn)錄水平上穩(wěn)定調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝，從而顯著提高逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒顆粒的產(chǎn)量，最高可達(dá)10倍。這一特性使其成為高滴度病毒生產(chǎn)的理想選擇。

★ 廣泛的適用性

無(wú)論是逆轉(zhuǎn)錄病毒還是慢病毒，ViralBoost Reagent都能有效增強(qiáng)其包裝效率。其廣泛的適用性使其適用于多種病毒系統(tǒng)和細(xì)胞類型，包括HEK 293T細(xì)胞等常用細(xì)胞系。

★ 低成本，高效益

通過(guò)顯著提高病毒顆粒的產(chǎn)量，ViralBoost Reagent幫助實(shí)驗(yàn)室在不增加成本的情況下實(shí)現(xiàn)高滴度病毒生產(chǎn)。這不僅節(jié)省了時(shí)間和資源，還提高了實(shí)驗(yàn)的整體效率。

★ 簡(jiǎn)單易用

ViralBoost Reagent的操作流程非常簡(jiǎn)便。在轉(zhuǎn)染HEK 293T細(xì)胞后6-14小時(shí)，只需將ViralBoost Reagent以1/500的體積比例加入新鮮培養(yǎng)基中，即可繼續(xù)培養(yǎng)。這種簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案使其適合各種規(guī)模的病毒包裝實(shí)驗(yàn)。

★ 穩(wěn)定的性能

每一批次的ViralBoost Reagent都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的功能測(cè)試，確保其在病毒包裝中的高效性和穩(wěn)定性。產(chǎn)品在4℃下可穩(wěn)定保存12個(gè)月。

訂購(gòu)信息

ViralBoost Reagent是一種新型的小分子混合物，專門用于高滴度病毒生產(chǎn)。它通過(guò)在轉(zhuǎn)錄水平上穩(wěn)定調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝，顯著提高逆轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒顆粒的產(chǎn)量，最高可達(dá)10倍。

品名：ViralBoost Reagent（VB100）

貨號(hào)：VB100

規(guī)格：1 ml

濃度：500X

儲(chǔ)存溫度：4°C

穩(wěn)定性：在4°C條件下保存，有效期為12個(gè)月。

相關(guān)產(chǎn)品推薦

•  Lentiviral Packaging Mix（VP100）：用于慢病毒包裝。

•  Lentivirus Precipitation Solution（VC100）：用于慢病毒濃縮。

•  NanoFect Transfection Reagent（NF100）：用于高效基因轉(zhuǎn)染。

使用方法

以下是使用ViralBoost Reagent進(jìn)行病毒包裝的典型流程：

1.第一天：細(xì)胞鋪板

用1x明膠涂布培養(yǎng)皿或平板30分鐘。吸出明膠，每100 mm平板接種約3-4×10?個(gè)HEK 293T細(xì)胞。每個(gè)平板使用10 ml培養(yǎng)基。

注意：確保細(xì)胞懸液分散均勻，避免細(xì)胞聚集。

2.第二天：轉(zhuǎn)染

準(zhǔn)備兩個(gè)試管，分別加入0.5 ml DMEM。

在一個(gè)試管中加入病毒載體和包裝混合物的DNA，輕敲試管使其充分混合。

在另一個(gè)試管中加入NanoFect轉(zhuǎn)染試劑（貨號(hào)NF100），輕敲試管混合。

將NanoFect-DMEM混合物轉(zhuǎn)移到DNA管中，上下吸移2-3次，渦旋5-10秒，充分混合。

在室溫下孵育15分鐘，使NanoFect/DNA復(fù)合物自組裝。

將NanoFect/DNA混合物滴加到平板中，輕輕搖動(dòng)平板并放回培養(yǎng)箱。

3.第三天：更換培養(yǎng)基并添加ViralBoost

吸出上清液，用10 ml新鮮培養(yǎng)基替換，并加入20 µl ViralBoost Reagent（500X）。

將平板放回細(xì)胞培養(yǎng)箱。

4.第四天：收集病毒

小心收集上清液至50 ml離心管中，置于冰上。

在4°C下，以1000×g離心10分鐘，去除細(xì)胞碎片。

使用0.45 µm過(guò)濾器過(guò)濾上清液，并將過(guò)濾后的上清液轉(zhuǎn)移至無(wú)菌容器中。

按照每4體積病毒上清液加入1體積的冷逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒沉淀溶液（貨號(hào)VC100或VC200）進(jìn)行濃縮。

5.第五天：濃縮病毒

在4°C下，以1500×g離心30分鐘。

離心后，病毒顆粒可能在容器底部形成米色或白色沉淀。

丟棄上清液，用1500×g離心5分鐘去除殘留液體。

用冷的無(wú)菌PBS或DMEM以原始體積的1/10至1/100重懸病毒沉淀，分裝至低溫小瓶中，并在-80°C下保存。

6.注意事項(xiàng)

使用前確保試劑充分溶解并混合均勻。

操作過(guò)程中需小心處理病毒材料，避免溢出。使用漂白劑對(duì)危險(xiǎn)液體進(jìn)行消毒（終濃度為10%，持續(xù)30分鐘）。

僅用于研究目的，不得用于診斷或治療程序。

基因治療中具體應(yīng)用

在基因治療領(lǐng)域，病毒載體的高效生產(chǎn)是實(shí)現(xiàn)臨床應(yīng)用和商業(yè)化的重要環(huán)節(jié)。然而，傳統(tǒng)的病毒載體生產(chǎn)方法往往面臨產(chǎn)量低、成本高、工藝復(fù)雜等問(wèn)題。alstemBio的ViralBoost Reagent（VB100）通過(guò)顯著提高病毒載體的產(chǎn)量和滴度，為基因治療提供了強(qiáng)大的助41力。

1. 顯著提高病毒載體產(chǎn)量

ViralBoost Reagent是一種新型的小分子混合物，能夠在轉(zhuǎn)錄水平上穩(wěn)定調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝，從而顯著提高逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒顆粒的產(chǎn)量，最高可達(dá)10倍。這對(duì)于基因治療中常用的病毒載體（如AAV、LV等）的生產(chǎn)具有重要意義。例如，在HEK 293T細(xì)胞中使用ViralBoost Reagent后，GFP慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率顯著提升，流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)顯示病毒顆粒產(chǎn)量大幅提升。

2. 優(yōu)化病毒載體生產(chǎn)效率

基因治療中常用的病毒載體（如AAV）在生產(chǎn)過(guò)程中常面臨內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ER stress）和未折疊蛋白響應(yīng)（UPR）等問(wèn)題，這些問(wèn)題會(huì)限制病毒載體的產(chǎn)量。ViralBoost Reagent通過(guò)調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝，能夠有效緩解這些問(wèn)題，從而提高病毒載體的生產(chǎn)效率。

3. 降低生產(chǎn)成本

通過(guò)顯著提高病毒載體的產(chǎn)量，ViralBoost Reagent能夠有效降低基因治療藥物的生產(chǎn)成本。這對(duì)于基因治療的商業(yè)化和大規(guī)模應(yīng)用至關(guān)重要。例如，傳統(tǒng)的AAV載體生產(chǎn)方法通常只能達(dá)到10?-1011 VG/mL的滴度，而使用ViralBoost Reagent后，滴度可顯著提高。

4. 廣泛的適用

ViralBoost Reagent適用于多種病毒載體的生產(chǎn)，包括逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒和腺相關(guān)病毒（AAV）。這種廣泛的適用性使其成為基因治療研究和生產(chǎn)的理想選擇，能夠滿足不同實(shí)驗(yàn)室和應(yīng)用場(chǎng)景的需求。

5. 簡(jiǎn)化操作流程

ViralBoost Reagent的操作流程非常簡(jiǎn)便。在轉(zhuǎn)染HEK 293T細(xì)胞后6-14小時(shí)，只需將ViralBoost Reagent以1/500的體積比例加入新鮮培養(yǎng)基中即可。這種簡(jiǎn)單的操作流程不僅節(jié)省了時(shí)間和人力，還減少了因操作復(fù)雜導(dǎo)致的誤差。

6. 支持基因治療的臨床應(yīng)用

在基因治療的臨床應(yīng)用中，高滴度的病毒載體是實(shí)現(xiàn)有效基因遞送的關(guān)鍵。ViralBoost Reagent通過(guò)提高病毒載體的產(chǎn)量和滴度，能夠更好地滿足臨床試驗(yàn)和商業(yè)化生產(chǎn)的需求。例如，在AAV載體的生產(chǎn)中，使用ViralBoost Reagent后，病毒基因組滴度和包裝效率顯著提高，這對(duì)于需要高劑量病毒載體的基因治療項(xiàng)目尤為重要。

ALSTEM Bio 是一家成立于2012年的創(chuàng)新型生物技術(shù)公司，總部位于美國(guó)舊金山灣區(qū)。公司專注于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）重編程技術(shù)、干細(xì)胞誘導(dǎo)和基因編輯相關(guān)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，并提供定制化服務(wù)。未來(lái)ALSTEM Bio 將繼續(xù)致力于開(kāi)發(fā)創(chuàng)新的干細(xì)胞研究工具和基因編輯技術(shù)，推動(dòng)再生醫(yī)學(xué)和個(gè)性化醫(yī)療的發(fā)展