avidity BirA 生物素說明書
BirA 生物素-蛋白質連接酶通過 ATP 中間體(生物素 5'-腺苷酸)以高效和有針對性的方式將 d-生物素共價添加到生物素受體肽/蛋白質上。該試劑盒包含 300 µg BirA 酶,適用于需要更大規模反應或在工作中更頻繁使用 BirA 生物素化反應的人員。
請注意:我們強烈建議使用 AviTag 氨基酸序列而不是其他生物素化肽序列。BirA 酶以 2 倍于天然底物 (BCCP) 的反應速率對 AviTag 序列進行生物素化,并且與使用的其他肽序列相比,其反應速率可達到一個數量級或更高。與其他多肽生物素化序列相比,AviTag™ 需要更少量的酶和更短的孵育時間,從而最大限度地減少與蛋白酶和蛋白質不穩定性相關的輔助問題。
套件作為:
BirA 生物素-蛋白質連接酶 (EC 6.3.4.15) 通過 ATP 中間體(生物素 5'-腺苷酸)以高效且有針對性的方式將 d-生物素與生物素受體肽/蛋白質共價添加。酶促生物素化蛋白質的下游應用是多種多樣的、重要的和強大的。生物素-親和素/鏈霉親和素相互作用經常被用于親和層析或蛋白質固定在表面或底物上。通過抗生物素抗體或親和素/鏈霉親和素-報告酶偶聯物(-HRP、-堿性磷酸酶)或熒光探針進行蛋白質檢測成為可能。生物素化 MHC 分子的多聚體形式是免疫生物學中的常用工具。
當與我們的 AviTag™ 生物素受體肽氨基酸序列結合使用時,生物素化發生的速度是天然大腸桿菌 BCCP 底物的兩倍,與其他肽序列的生物素化相比,其發生率高出一個數量級或更多。因此,與其他可用序列相比,AviTag™ 序列需要更少的 BirA 酶和更短的孵育時間來完成生物素化。如果蛋白質不穩定性或蛋白酶活性是一個問題,這可能對下游的成功很重要。
我們的 BirA 酶是大腸桿菌野生型,由 birA 基因編碼,并通過傳統方法純化至 99% 以上的純度。
這種酶的其他名稱包括:生物素連接酶;生物素操縱子阻遏蛋白;比拉; 生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶;生物素-[乙酰輔酶A-羧化酶]連接酶;生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶;乙酰輔酶A全羧化酶合成酶;乙酰輔酶A全羧化酶合成酶;生物素:脫羧酶連接酶;生物素全酶合成酶;HCS。
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