finabio重組CRM197白喉毒素突變體-上海起發現貨
可提供cGMP等級,可用于批準上市的結合疫苗
產品描述:
來源:熒光假單胞菌重組表達的 CRM197
產品分子量:58.4 kDa
純度:>95% CRM197 by SE-HPLC or RP-HPLC or SDS-PAGE
內毒素:<100 EU/mg of protein by LAL method
二聚物:<5%
**重組CRM197(bulk)產品是根據現行cGMP生產規范和ICH Q7和ICH Q11(視情況而定)指導原則制造的,重組CRM197(bulk)作為活性物質起始材料,用于終用戶進一步制造合適的原料藥和/或藥品
實驗數據
產品特點
(1)避免了在病原微生物中緩慢,復雜和昂貴的生產
(2)提供研究用和cGMP等級的重組CRM197 載體蛋白**
(3)從研究等級(mg級)到cGMP等級(kg級)的產品和工藝保持一致性
(4)加速疫苗研發進入臨床,是疫苗開發和商業化的經濟有效的關鍵材料來源
(5)可提供生物制品生產主文件(Master File),用于支持FDA臨床監管申報和美國以外區域的同等機構申報
(6)應用領域
疫苗開發和生產
收到CRM197凍干粉后請保存在2-8°C。
使用前,用無菌去離子水將凍干的CRM197無菌復原至4 mg/mL的濃度 。
配置好的重組CRM197應在2-8°C下儲存。
白喉毒素的兩個無毒突變體的氨基酸序列:CRM45和CRM197。
核酸研究| G Giannini,R Rappuoli和G Ratti | 1984年5月25日
摘要:從與白喉毒素相關的兩個無毒蛋白CRM45和CRM197的完整序列推導了它們的氨基酸序列:tox 45和tox197。CRM45缺少后149個C端氨基酸殘基,但在其他方面與白喉毒素相同:在蘇氨酸386的密碼子之后,單個C-T躍遷在毒素45中引入了“ re色”(TAA)終止信號。在毒素197中也發現了一個單一的G-A過渡,導致野生型毒素中存在的甘氨酸52被CRM197中的谷氨酸取代。這種氨基酸變化是造成CRM197中NAD:EF2 ADP-核糖基轉移酶活性喪失的原因,有可能是由于NAD +結合位點的改變。
Vero細胞膜中白喉毒素受體和非蛋白質白喉毒素結合分子的鑒定
細胞生物學雜志| 作者:E. Mekada和TJ Uchida | 1988年8月1日
摘要:發現對DT敏感的Vero細胞的膜部分中存在兩種具有結合白喉毒素(DT)的能力的物質。根據其與DT結合并抑制其細胞毒性作用的能力,發現了其中一種物質。該抑制物質競爭性地抑制了DT與Vero細胞的結合。但是,該抑制劑不能與DT基因錯義突變的產物CRM197結合,也不能抑制CRM197與Vero細胞的結合。此外,在對DT不敏感的小鼠細胞的膜級分中觀察到了相似水平的抑制活性,表明該抑制劑不是DT敏感細胞中*的DT受體。通過測定125I標記的CRM197的結合,在同一Vero細胞膜制備物中發現了第二種DT結合物質。在小鼠L細胞的膜制備中未觀察到這種DT結合活性。通過使用標記的DT和CRM蛋白進行的競爭研究,我們得出結論,這種結合活性是由于DT的表面受體引起的。用幾種酶處理這些物質表明,該抑制劑對某些RNase敏感,但對蛋白酶有抵抗力,而DT受體對RNase有抵抗力,但對蛋白酶敏感。將該受體溶解并通過在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進行部分純化。對部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。我們得出結論,這種結合活性是由于DT的表面受體引起的。用幾種酶處理這些物質表明,該抑制劑對某些RNase敏感,但對蛋白酶有抵抗力,而DT受體對RNase有抵抗力,但對蛋白酶敏感。將該受體溶解并通過在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進行部分純化。對部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。我們得出結論,這種結合活性是由于DT的表面受體引起的。用幾種酶處理這些物質表明,該抑制劑對某些RNase敏感,但對蛋白酶有抵抗力,而DT受體對RNase有抵抗力,但對蛋白酶敏感。將該受體溶解并通過在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進行部分純化。對部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。將該受體溶解并通過在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進行部分純化。對部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。將該受體溶解并通過在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進行部分純化。對部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。
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