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creativemolecules 001SS說明書

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BS 3-H12/D12

產品信息BS 3-H12/D12雙硫琥珀酰亞胺亞甲酸酯12 x 1 mg BS 3-H12和BS 3-D12的1:1摩爾比混合物,目錄號:編號:001SS C16H18N2Na2O14S2/C16D12H6N2Na2O14S2 MW 572/584特征:同位素編碼。
水溶性。
用于死端交聯的240/252銨離子。
BS3-H12/D12是一種水溶性、同雙功能、同位素編碼的交聯劑雙磺琥珀酰亞胺亞酸酯。試劑的輕(H12)和重(D12)形式的區別在于重形式的12個氘原子,而不是輕形式的12個氫原子,否則在化學上是相同的。同位素編碼能夠在質譜中明確檢測交聯產物。
BS3-H12/D12的反應產物將在質譜中表現為強度相等的雙峰,對應于試劑的輕(H12)和重(D12)形式,以12.07573 Da除以電荷狀態(+ 1為12.07,+ 2為6.04,+ 3為4.03等)。
在pH 7-9緩沖液中,N-羥基磺琥珀酰亞胺(NHSS)酯主要與伯氨基(-NH2)反應,形成穩定的酰胺鍵。因此,交聯反應應避免使用含胺的緩沖液(Tris、甘氨酸、銨鹽等)。BS3具有水溶性,可在水中制備貯備液。為制備50 mM BS3-H12/D12儲備液,向含有1 mg試劑的預稱重管中加入35 l水。

 

使用以下公式計算肽交聯質量:[M12 + H]+ =[M1 + H]+ +[M2 + H]+ + 137.06025[M1OH + H]+ =[M1 + H]+ + 156.07864[M1i + H]+ =[M1 + H]+ + + 138.06808[M1NH2 + H]+ =[M1 + H]+ + + 155.09462,其中M1、M2-游離肽質量;M12-肽間交聯質量;M1OH-死端交聯質量;M1i–肽內交聯的質量;M1NH2–死端酰胺的質量(如果用銨鹽淬滅反應)。
MS-Bridge  橋元素組成:C8 H10 O2;–OH死角的修飾元素組成:C8 H12 O3;–NH2死角的修飾元素組成:C8 H13 O2 N。
FLAG(DYKDDDDK)肽測試反應的典型MALDI質譜圖如圖1所示。試劑的輕(H12)形式的反應產物的質量為:1013–無FLAG肽;1151–肽內交聯;1169–死端交聯;2163–肽間交聯。
MSMS光譜中對應于試劑賴氨酸銨離子修飾的240/252雙峰信號表明存在–OH死端交聯(參考文獻1)。1、2)、(圖2)。
 

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