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KANEKA KanCapA™ 抗體純化樹(shù)脂-上海起發(fā)

更新時(shí)間:2021-01-29      點(diǎn)擊次數(shù):1560

KANEKA KanCapA™ 抗體純化樹(shù)脂-上海起發(fā)

 

抗體純化樹(shù)脂? -富士膠片和光

KANEKA KanCapA™

 

   

  

  本產(chǎn)品為Protein A親和層析樹(shù)脂。用于從活體樣本及細(xì)胞培養(yǎng)上清.純化免疫球蛋白及包含F(xiàn)c段的重組抗體。

  本產(chǎn)品由高交聯(lián)纖維素微珠及新研發(fā)的耐堿Protein A配體構(gòu)成,可用于IgG的親和純化。

 

 

◆特點(diǎn)

 

  • 耐堿

  • 良好洗脫條件

  • 高抗體結(jié)合能力

  • 可循環(huán)使用

  • 便于擴(kuò)增

 

 

◆關(guān)于改良Protein A

 

  

  KanCapA™采用的不是天然Protein A,而是使用變異型C域5聚物的新型Protein A。

  天然Protein A的C域結(jié)合于Fc段,也結(jié)合于Fab段,其中與VH3亞家族抗體的反應(yīng)性較高。該類(lèi)型的解離需要弱酸條件下洗脫。

  為改善該問(wèn)題,使用分子設(shè)計(jì)系統(tǒng)重新設(shè)計(jì)分子,研發(fā)了保持耐堿性、改善Fab段的非特異性結(jié)合及洗脫曲線(xiàn)的Protein A。

 

 

本產(chǎn)品采用的Protein A

 

1.C5聚體蛋白質(zhì)

搜狗截圖20160727141313.png

良好pH條件下清晰地洗脫抗體 

2.較高的耐堿性

3.減少Fab段的非特異性結(jié)合

 

 

◆產(chǎn)品特性

 

KANEKA KanCapA™ 產(chǎn)品特性

 

矩陣

高交聯(lián)纖維

 ※

 1) 平均粒度為累積體積分布的中間粒度

 2) 5%動(dòng)態(tài)結(jié)合容量為前端分析測(cè)定(停留時(shí)間3分鐘)

 3) 可在強(qiáng)堿條件下清洗,但請(qǐng)避免長(zhǎng)時(shí)間的清洗

 4) 請(qǐng)勿冷凍

平均粒度1)

65-85μm

配體

Protein A,重組(抗強(qiáng)堿)

結(jié)合

化學(xué)結(jié)合(還原胺化)

動(dòng)態(tài)結(jié)合容量2)

≧35mg 人多克隆IgG/mL載體

化學(xué)穩(wěn)定性3)

使用親和層析通用可溶性溶媒時(shí)較穩(wěn)定

pH范圍3)

pH 2-13

靜止清洗條件3)

0.1-0.5 mol/L氫氧化鈉
6-8 mol/L尿素、6 mol/L鹽酸胍

流量

大500cm/h(層高: 20-25cm)

停留時(shí)間

≧3分鐘(建議:4-6分鐘)

保存條件4)

20%乙醇渾濁液,1~10℃

 

 

◆應(yīng)用

 

1、Fab段純化應(yīng)用

 

 • 利用KANEKA KanCapA™的特點(diǎn),可從經(jīng)木瓜蛋白酶處理后的IgG溶液分餾Fc段及Fab段。

 

3-.jpg

 

 

2、IgG洗脫曲線(xiàn)(pH3.5 & pH3.0)

 

 • 洗脫范圍已優(yōu)化,可清晰地分餾提純。

 

4-.jpg

 

 

 

3、通過(guò)強(qiáng)堿清洗進(jìn)行樹(shù)脂循環(huán)

 

 • 進(jìn)行300次循環(huán)處理后(0.1M氫氧化鈉溶液,15分鐘),IgG的結(jié)合容量的減少率仍低于20%,表明其循環(huán)性能較高。

 

5-.jpg6-.jpg

 

使用0.1 M氫氧化鈉溶液進(jìn)行循環(huán)處理后的IgG結(jié)合活性曲線(xiàn)數(shù)據(jù)

循環(huán)處理后(0.1M氫氧化鈉溶液 15分鐘)的IgG回收率及ProteinA配體的滲濾量的曲線(xiàn)數(shù)據(jù) 

 

 

4、動(dòng)態(tài)結(jié)合容量 曲線(xiàn)數(shù)據(jù)

 

 • 在4-6分鐘停留時(shí)間過(guò)程中,DBC較高。

  ※ 動(dòng)態(tài)結(jié)合容量表示純化樣本在流動(dòng)的狀態(tài)下,回收程度的數(shù)值。動(dòng)態(tài)結(jié)合容量較高的載體的流速較快,可回收大量目標(biāo)分子,因此可以認(rèn)為在短時(shí)間內(nèi)有效純化目標(biāo)分子的優(yōu)質(zhì)載體。

 

7-.jpg

       KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 動(dòng)態(tài)結(jié)合容量) 曲線(xiàn)數(shù)據(jù)

 

 

5、不同大小的樹(shù)脂填充裝柱的壓力/流速繪圖數(shù)據(jù)

 

8-.jpg

                填充依賴(lài)壓力的計(jì)算方法是從整體壓力減去系統(tǒng)壓力。

 

 

6、KANEKA KanCapA™于各種大小的柱的填充效果

 

  • KANEKA KanCapA™適用于各種大小的柱。

 

充填方法

L. D.(厘米)

高度(毫米)

培養(yǎng)皿/米

非對(duì)稱(chēng)性

流動(dòng)填充

4.4

200

5710

1.14

軸向力填充

7

199

6063

1.06

流動(dòng)填充

10

201

5276

1.18

流動(dòng)填充

30

200

5208

1.17

軸向力填充

45

233

4712

1.09

 

以下是脈沖注入數(shù)據(jù):

  可溶性溶媒:1(v/v)% 丙酮

  注入量:1% 柱容量

  流速:60 cm/h

 

 

◆產(chǎn)品列表

 

產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱(chēng)規(guī)格
114-01071KANEKA KanCapA™2mL (net 1mL)
110-0107310mL (net 5mL)
118-0107450mL (net 25mL)
上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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