fivephoton DnsylD-1說(shuō)明書

熒光多巴胺| 熒光神經(jīng)遞質(zhì) - 丹磺酰5-C共軛| FIVEPHOTON BIOCHEMICALS | 丹磺酰 - 多巴胺| 部分DNSYLD-1

熒光多巴胺神經(jīng)遞質(zhì) 

（用通過(guò)5碳間隔臂連接的丹磺酰基標(biāo)記的多巴胺：Ex / Em：333 / 515nm）。Syn：Dansyl-Dopamine，Part DnsylD-1^TM

Fivephoton Biochemicals的專有產(chǎn)品

圖標(biāo)圖像：在96孔培養(yǎng)皿的孔上方的多個(gè)標(biāo)記細(xì)胞的低放大倍數(shù)視圖。

強(qiáng)調(diào)

1. Pharmalogical屬性幾乎與天然多巴胺相同。
2. DnsylD-1在納摩爾濃度下選擇性地在攝取和結(jié)合測(cè)定中操作。 
3. 天然多巴胺化學(xué)結(jié)構(gòu)是該熒光兒茶酚胺的主要成分，產(chǎn)生對(duì)所有多巴胺受體亞型以及多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白具有高親和力的熒光神經(jīng)遞質(zhì)分子。
4. 帶有5碳多聯(lián)體多巴胺的小丹參標(biāo)記產(chǎn)生穩(wěn)定，明亮的熒光信號(hào)，空間位阻可忽略不計(jì)。 
5. 丹酰熒光標(biāo)簽提供大的斯托克斯位移，使自發(fā)熒光和非特定背景信號(hào)小化：（Ex / Em：313 / 515nm）。
6. DnsylD-1 ^TM的熒光信號(hào) 可被多巴胺受體和DAT的標(biāo)準(zhǔn)抑制劑阻斷。
7. 標(biāo)準(zhǔn)抑制劑可用于區(qū)分DnsylD-1 ^TM  與多巴胺受體和DAT 的相互作用。
8. 來(lái)自DnsylD-1 ^TM的熒光 與酪氨酸羥化酶共定位并鑒定多巴胺能神經(jīng)元。
9. 為了測(cè)定多巴胺受體結(jié)合，首先將提供的固體懸浮于DMSO（10-50μl）中。離心機(jī)，澄清，并收集DMSO可溶部分，其可被等分并儲(chǔ)存在-20 ^ø C：DnsylD-1 ^TM  懸浮于DMSO時(shí)和冷凍于-20 ^Ô C是至少2年的穩(wěn)定。將DMSO溶解的物質(zhì)稀釋到測(cè)定緩沖液（例如PBS-BSA）中至所需的測(cè)定濃度。 通過(guò)熒光顯微鏡，熒光板讀數(shù)器或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DnsylD-1 ^TM。將熒光檢測(cè)設(shè)備設(shè)置為Ex / Em：333/515 nm。

數(shù)量¹

可提供批量和定制合成。請(qǐng)咨詢customersupport@fivephoton.com

¹為了估計(jì) 您需要的DnsylD-1 ^TM的量，使用多巴胺Kd的10到100倍的測(cè)定濃度用于您正在研究的多巴胺受體亞型或轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（使用文獻(xiàn)綜述來(lái)確定平均報(bào)告的Kd值多巴胺受體亞型或轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白）。然后估計(jì)所需您的測(cè)定中的總的外部測(cè)定緩沖液體積（例如50微升每孔的測(cè)定緩沖液在96孔培養(yǎng)皿乘以孔的數(shù)目），以計(jì)算DnsylD-1的量^TM  整個(gè)所需檢測(cè)。如需技術(shù)支持，請(qǐng)聯(lián)系technicalsupport@fivephoton.com或致電：800.462.4507（：858.395.4026）。

產(chǎn)品規(guī)格

• 光譜特征和測(cè)定波長(zhǎng)：Ex：Em：333：515nm
• MW：499.62（質(zhì)量和QC由MALDI驗(yàn)證）
• 外觀：凍干的灰白色固體
• 純度：≥95％（HPLC;查看批次純度的COA）
• 溶解度：DMSO
• 分析性QC測(cè)試：MALDI MS和HPLC
• 使用10X Kd的未標(biāo)記多巴胺對(duì)各自的多巴胺受體亞型或轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白
• 存儲(chǔ)（凍干粉）：4 ^ø C，暗，變干。存儲(chǔ)在DMSO中溶解時(shí)：-20 ^Ó C，等分試樣。
• 運(yùn)輸：環(huán)境溫度。

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熒光多巴胺神經(jīng)遞質(zhì)配體（丹磺酰 - 多巴胺），概述

這種熒光標(biāo)記的多巴胺兒茶酚胺神經(jīng)遞質(zhì)類似物（產(chǎn)品名稱：DnsylD-1 ^TM），丹磺酰基通過(guò)5-碳間隔臂與多巴胺連接，提供了*的藥理學(xué)工具。DnsylD-1 ^TM 是一種穩(wěn)定的受體選擇性和高親和力藥理配體，可通過(guò)熒光顯微鏡和FLIPR裝置檢測(cè)。與近報(bào)道的合成熒光神經(jīng)遞質(zhì)類似物不同，DnsylD-1 ^TM  含有與5-碳多接頭連接的完整天然多巴胺結(jié)構(gòu)部分至小熒光標(biāo)記丹酰。這種結(jié)構(gòu)修飾使空間位阻小化，使DnsylD-1 ^TM成為可能 納摩爾濃度的多巴胺配體結(jié)合和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白攝取試驗(yàn)的有效試劑。 

丹毒熒光標(biāo)簽在激發(fā)和發(fā)射大值之間提供大的斯托克斯位移（Ex：Em，313：515 nm），與其他熒光標(biāo)簽如FITC不同，有助于以小的自發(fā)熒光進(jìn)行高信噪比檢測(cè)。丹磺酰部分還改變分子間接觸的光譜特征，促進(jìn)配體 - 受體相互作用的生物物理表征。DnsylD-1 ^TM  是放射性配體的合適替代物。

熒光多巴胺配體 - 神經(jīng)遞質(zhì)（DnsylD-1 ^TM）的應(yīng)用

DnsylD-1 ^TM 具有以下適用性，因?yàn)榈晒鈽?biāo)記的分子尺寸小，多巴胺結(jié)構(gòu)和熒光標(biāo)記之間的長(zhǎng)間隔臂，水溶液中的穩(wěn)定性和周圍細(xì)胞或組織培養(yǎng)基的低自發(fā)熒光。

1. 藥理學(xué)應(yīng)用作為放射性配體的替代品。
2. 多巴胺能神經(jīng)元檢測(cè)：生物標(biāo)志物檢測(cè)。
3. 多巴胺攝取分析。
4. 體內(nèi)和體外多巴胺受體表達(dá)的組織化學(xué)成像和定量。
5. 多巴胺代謝和營(yíng)業(yè)額分析。
6. 分析與改變的多巴胺合成，多巴胺受體表達(dá)或多巴胺攝取相關(guān)的疾病狀況：人類疾病研究在以下方面的適用性：a）帕金森氏病。b）心理障礙，包括ADHD，精神分裂癥和藥物濫用。c）心血管，腎臟和免疫功能的生理調(diào)節(jié)。

圖像：   DnsylD-1 ^TM （丹酰基 - 多巴胺）與神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞結(jié)合，并通過(guò)低倍熒光顯微鏡在96孔板的孔中觀察。顯示多個(gè)單元格。  

小組。內(nèi)源性表達(dá)多巴胺受體的大鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞在96孔培養(yǎng)皿的孔中生長(zhǎng)，與DnsylD-1 ^TM孵育30分鐘， 濃度為多巴胺對(duì)D2多巴胺受體的Kd濃度的10倍。用熒光顯微鏡在孔頂部以50X放大率拍攝圖像。

底部面板。在暴露DnsylD-1 ^TM之前，將LD X Xd濃度的未標(biāo)記多巴胺預(yù)曝光15分鐘，以DX 的Kd濃度為10倍，如上圖所示。未標(biāo)記的多巴胺的預(yù)暴露有效地阻斷DnsylD-1 ^TM的結(jié)合， 表現(xiàn)出高親和力和選擇性。

產(chǎn)品參考

May S，Andreasson-Ochsner M，F(xiàn)u Z，Low YX，Tan D，de Hoog HP，Ritz S，Nallani M，Sinner EK。2013.體外表達(dá)的GPCR插入聚合物膜用于配體結(jié)合研究。Angew。化學(xué)。詮釋。Ed，52,749-753