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ALSTEM CILV02說明書

更新時間:2018-11-29      點擊次數:2123

 

ALSTEM是一家位于灣區的早期生物技術公司,擁有快速擴展的產品和服務組合,為生物制藥和學術機構提供服務。受到加利福尼亞干細胞研究承諾的啟發,ALSTEM于2012年由具有iPS細胞重編程和基因組編輯技術專業知識的科學家創立。

hTERT Cell Immortalization Kit: #CILV02

 

hTERT細胞永生化試劑盒:#CILV02

 

描述

 

*,原代細胞僅在培養中經歷預定的和有限數量的細胞分裂。在有限的群體倍增(其數量因物種,細胞類型和培養條件而異)之后,原代細胞進入一種狀態,即所謂的復制衰老,它們不再分裂。為了超越衰老,存在幾種使培養中的哺乳動物細胞永生化的方法。近發現的細胞永生化方法是通過端粒酶逆轉錄酶蛋白(TERT)的表達。它對受端粒長度影響大的細胞特別有用,包??括許多人類細胞類型。這種蛋白質通常在大多數體細胞中沉默。當外源引入hTERT時,這些細胞能夠通過維持足夠的端粒長度來避免復制性衰老。

 

產品名稱

hTERT細胞永生化試劑盒

目錄 #

CILV02

尺寸

5 x20μl

運輸

干冰

儲存和穩定性

儲存在-80°C(穩定長達6個月)。

質量控制

包裝的慢病毒構建體作為冷凍的VSV-G假型病毒顆粒提供。通過Clontech的Lenti-X qRT-PCR滴定試劑盒(Cat。#631235)測量慢病毒的滴度。每批細胞永生化試劑盒在成纖維細胞中進行功能測試。

限制使用

僅供研究使用。不得用于診斷或治療程序。

 

 

  • 概觀

用含有hTERT的重組慢病毒感染細胞,用嘌呤霉素篩選產生自己的永生化細胞

  • 程序
  • 將靶細胞以1-2×10 5個細胞/孔的密度鋪在6孔板的一個孔中。
  • 第二天,將濃縮的重組慢病毒在37℃水浴中解凍,并在解凍時立即將其從浴中取出。
  • 在4μlTransPlus試劑(ALSTEM,目錄號V050)存在下,用4-20μl/孔上清液感染6孔板中的靶細胞。
    注意:TransPlus試劑是一種聚陽離子,可中和電荷相互作用,從而增加假病毒衣殼與細胞膜之間的結合。
  • 第二天,去除病毒上清液并將適當的*生長培養基加入細胞中并在37℃下孵育。
  • 孵育72小時后,將細胞繼代培養到2×100mm培養皿中并加入適量的嘌呤霉素以穩定細胞系產生。
  • 選擇后10-15天,挑選克隆進行擴增,篩選陽性克隆。
    注意:解凍后,我們建議不要將上清液再次冷凍以備將來使用,因為病毒滴度會顯著下降

貨號

品名

規格

品牌

VB100

ViralBoost

1毫升

alstembio

VC100

慢病毒沉淀解決方案

100毫升/ 250毫升/ 500毫升

alstembio

V020

TransPlus™病毒轉導增強劑

100μl/500μl

alstembio

CILV02

hTERT細胞永生化試劑盒

5 x20μl

alstembio

 

 

上海起發實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務商

1:強大的進口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。

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