Favorgen FASOI 001-1說明書
Favorgen位于中國臺灣國家生物技術園區。它通過自動化系統建立了ISO合格工廠,
生產高質量的分子生物學產品和臨床化學試劑。目前,Favorgen在美國,中國,韓國和丹麥設立分支機構,并在30多個國家設立了分銷網絡。自成立以來,Favorgen已經在其先進的生產設施上投入了大量資金,以競爭力的價格為客戶提供高質量的產品。Favorgen致力于通過與學術和行業合作伙伴的內部和合作開展研究,以不斷提供高質量的創新產品。
核酸提取土壤DNA小試劑盒
FavorPrepTM Soil DNA Isolation Mini Kit
Favorgen FASOI 001-1說明書
Cat.No. : FASOI 000, 4 preps
FASOI 001, 50 Preps
FASOI 001-1, 100 Preps
(For Research Use Only)
FASOI 000
(4 preps_sample)
FASOI 001
(50 preps)
FASOI 001-1
(100 preps)
Glass Beads | 1 g | 12 g | 25 g |
SDE1 Buffer | 3.6 ml | 40 ml | 70 ml |
SDE2 Buffer | 1.2 ml | 15 ml | 25 ml |
SDE3 Buffer | 1.2 ml | 15 ml | 30 ml |
SDE4 Buffer | 1.5 ml | 25 ml | 40 ml |
Wash Buffer (concentrate) * | 1.5 ml | 20 ml | 40 ml |
Elution Buffer | 1.5 ml | 25ml | 50 ml |
SDE Mini Column | 4 pcs | 50 pcs | 100 pcs |
Collection Tube | 8 pcs | 100 pcs | 200 pcs |
Elution Tube | 4 pcs | 50 pcs | 100 pcs |
Bead tube | 4 pcs | 50 pcs | 100 pcs |
User Manual | 1 | 1 | 1 |
* Preparation of Wash Buffer for first use: | |||
Cat. No: | FASOI 000 | FASOI 001 | FASOI 001-1 |
ethanol volume for Wash Buffer | 6 ml | 80 ml | 160 ml |
規格:
原理:自旋柱(硅膠膜)樣品:0.25~0.5g
手術時間:<60分鐘排氣量:50~200毫升
重要說明:
本系統中提供的緩沖區包含刺激物。在處理這些緩沖器時,戴上手套和實驗室外套。
使用前檢查SDE 1緩沖液,如有沉淀,應在60℃溫10分鐘。
使用前,在洗滌緩沖液中加入適量乙醇(96%-100%)。
準備加熱塊或水浴至70°C。如果從革蘭氏陽性細菌中分離出DNA,則準備加熱塊或水浴至95°C進行另一次培養。
所有的離心步驟都是在微型離心機中全速進行的(~18,000 x g)。
預熱洗脫緩沖液或ddH2O至60°C為洗脫步驟。
“一般性議定書”:
在開始以下步驟之前,請閱讀重要說明。
加入200毫克玻璃珠到2.0毫升珠管(提供)。將0.25~0.5g的土樣移入珠管,然后放置在冰上。
-如果樣品是液體的,在2.0毫升的珠管中加入200毫升的樣品。
在樣品中加入600升SDE 1緩沖器,以大速度旋轉5分鐘。將樣品在70℃下孵育10 min,在孵育過程中旋轉兩次。
-從革蘭陽性桿菌中分離DNA,在95℃下進一步孵育5分鐘。
簡單地旋轉管子,以去除從蓋子內部滴下來。
冷卻樣品混合物,加入200升SDE2緩沖液。通過渦旋使混合均勻。將樣品在冰上孵育5分鐘。
全速離心(~18,000×g)5分鐘。
仔細地將澄清的上清液轉移到1.5毫升的微離心管(未提供)。測量上清液的體積。
-避免將任何碎片和彈丸打穿。
加入1體積異丙醇和渦旋混合均勻,全速離心10 min,使DNA顆粒化。
-例如:如果澄清的溶解液體積為450升,則在澄清的裂解液中加入450升異丙醇。
小心丟棄上清液,在紙巾上倒置管1分鐘,去除殘留液體。
-不要打亂佩爾號
加入200升預加熱排放緩沖液或ddH2O,旋渦使DNA顆粒*溶解。
在樣品中加入100升SDE 3緩沖器,通過渦旋將其混合均勻。將樣品在室溫下孵育3分鐘。
-注:SDE 3緩沖器必須在每次使用前,通過大力vrotexing*暫停。
-切斷1毫升針尖的末端,使SDE 3緩沖器的插入更容易。
一
v 0515
全速離心2分鐘。
小心地將上清液轉移到1.5毫升的微離心機上(未提供)。測量上清液的體積。
-避免將任何碎片和彈丸打穿。
(可選)如果需要無RNA的DNA,加入1升100毫克/毫升的RNase A(不提供)到樣品中,混合好。室溫培養2 min。
簡單地旋轉管子,以去除從蓋子內部滴下來。
加入1份SDE 4緩沖液和1份乙醇(96%~100%)。通過脈沖旋渦充分混合.
例如:當澄清液體積為250 l時,加入250升SDE 4緩沖液和250升乙醇(96%~100%)。
將SDE柱放入收集管中,并將所有樣品混合物轉移到SDE柱。全速離心1分鐘,然后丟棄流過,然后將sde柱放入ne中。 W收集管。
加入750升洗滌緩沖液(乙醇添加)到SDE柱。全速離心1分鐘,然后丟棄流道.
-確保在次使用時將乙醇(96%~100%)加入到洗滌緩沖液中。
重復第17步。
全速離心3分鐘,干燥SDE柱。
-重要的一步!這一步將避免殘留液體抑制后續的酶反應。
將SDE柱放入1.5毫升的微離心管(未提供)。在SDE塔膜中心加入50~200μl預熱排液緩沖液或ddH2O。將SDE柱放置2分鐘 室溫。
-重要的一步!為了進行有效的洗脫,確保洗脫緩沖液或ddH2O被分配到膜中心并被*吸收。
全速離心1 min以逃避DNA。
發現并修理故障,解決紛爭
問題 | 可能的原因 | 解答 |
基因組DNA的低產率或無產率 | ||
| 樣本存儲不當 | 糞便樣本存放在-20°C。 |
樣本中細胞數量少 | 增加樣本量 | |
不良細胞溶解 | ||
細胞溶解能力差,因為打珠不夠 time | 延長珠子打漿時間。 | |
DNA與柱膜結合不足 | ||
在dna結合之前,沒有在樣品中加入乙醇。 | 確保在DNA結合之前,在樣品中加入一定量的乙醇(96%-100%)。 | |
乙醇和樣品裂解液在DNA結合之前沒有很好的混合。 | 確保乙醇和樣品裂解液在dna結合之前已*混合。 | |
W1/W2洗滌緩沖液制備不當 | ||
次使用時不加乙醇。 | 次使用時不加乙醇。 | |
在洗滌緩沖液中加入乙醇的體積或百分比是不正確的。 | 次使用時,一定要將適量的乙醇(96%-100%)加入到洗滌緩沖液中。 | |
DNA洗脫無效。 | ||
洗脫用水(DdH2O)的pH是酸性的。 | 確保ddH2O的pH值在7.0-8.5之間。 | |
使用洗脫緩沖液(提供)進行洗脫。. | ||
洗脫緩沖液或ddH2O不能被柱膜*吸收。 | 加入萃取緩沖液或ddH2O后,在離心前將SD柱放置5 min。 | |
基因組DNA質量差 | ||
A 260/A 280
洗脫DNA率低 | 不良細胞溶解 | |
細胞溶解能力差,因為打珠時間不夠 | 延長珠子打漿時間。 | |
A 260/A 280
洗脫DNA率高 | 洗脫DNA中的大量殘留RNA | 在洗脫液中加入8升RNase A(50 mg/ml),37℃孵育10 min。孵育后,加入200升SD2緩沖液和200升乙醇(96%~100%),混合均勻。
-渦旋。然后從第7步開始遵循“一般協議”。 |
FASOI 000 | FavorPrep™土壤DNA分離迷你試劑盒 | 4個準備。 | Glass Beads | 在室溫(15~25℃)下保存2年。 |
FASOI 001 | 50個準備。 | |||
FASOI 001-1 | 100個準備。 | |||
FASOI 002 | FavorPrep™土壤DNA分離Midi試劑盒 | 24個準備。 | Glass Beads | 在室溫(15~25℃)下保存2年。 |
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