Favorgen FABGK000-Maxi說明書
Favorgen位于中國臺灣國家生物技術園區。它通過自動化系統建立了ISO合格工廠,
生產高質量的分子生物學產品和臨床化學試劑。目前,Favorgen在美國,中國,韓國和丹麥設立分支機構,并在30多個國家設立了分銷網絡。自成立以來,Favorgen已經在其先進的生產設施上投入了大量資金,以競爭力的價格為客戶提供高質量的產品。Favorgen致力于通過與學術和行業合作伙伴的內部和合作開展研究,以不斷提供高質量的創新產品。
Favorgen FABGK000-Maxi說明書
FavorPrepTM Blood / Cultured Cell Genomic DNA Extraction Maxi Kit
(For Research Use Only)
Cat. No.
/ preps
FABGK000-Maxi
(2 preps)
FABGK003
(10 preps)
FABGK003-1
(24 preps)
Proteinase K powder+ 11 mg x 2 11 mg x 10 11 mg x 24
FABG Buffer 22 ml 110 ml 265 ml
W1 Buffer* (concentrated) 6.5 ml 33 ml 88 ml
Wash Buffer** (concentrated) 3 ml 20 ml 40 ml
Elution Buffer 6 ml 30 ml 60 ml
FABG Maxi Column 2 pcs 10 pcs 24 pcs
Elution Tube (50 ml tube) 2 pcs 10 pcs 24 pcs
User Manual 1 1 1
Preparation of ProteinaseK solution (20mg/ml) and Wash Buffer for first use:
Cat. No: | FABGK000-Maxi (2 preps) | FABGK003 (10 preps) | FABGK003-1 (24 preps) |
+ ddH2O volume for Proteinase K | 0.5 ml | ||
* ethanol volume for Wash Buffer W1 | 2.5 ml | 12 ml | 32 ml |
**ethanol volume for Wash Buffer W2 | 12 ml | 80 ml | 160 ml |
規格:
原理:自旋柱(硅膠膜)
樣本大?。盒迈r/冷凍血液10毫升;培養細胞1×10 8
柱容量:500微克DNA
平均DNA產量:35g/1ml全血處理時間:1小時
洗脫體積:0.75~1.5ml
需由用戶提供的材料
吸管和管尖
離心機:應能產生4,000克熱孵化器的力
烘箱(可選)乙醇(96%~100%)渦旋
重要說明:
本系統中提供的緩沖區包含刺激物。在處理這些緩沖器時,戴上手套和實驗室外套。
手術前將熱孵化器預熱至60°C。
在所有的離心步驟中,使用帶有擺動桶轉子的離心機和4,000~6,000克的力。
將500升無菌的ddH2O加入到延長K管中,制成22毫克/毫升的原液。確定蛋白酶K粉已*溶解。將庫存溶液存放在4°C。
為步驟11(釋放步驟)過熱釋放緩沖器或ddH2O。
血液DNA提取協議
在開始以下步驟之前,請閱讀重要說明。
將多達10毫升的樣本(全血、布菲大衣)轉移到50毫升離心管(未提供)。
--如果樣品體積小于10mL,則加入PBS使體積達到10mL。
在樣品中加入500升蛋白酶K(20 mg/ml),用旋渦法攪拌均勻。在樣品混合物中加入10毫升的光纖光柵緩沖液。通過脈沖旋渦充分混合.
-不要直接將蛋白酶K添加到FABG緩沖液中。
將樣品混合物在60℃下孵育15分鐘,以使樣品分離。在孵化過程中,每3-5分鐘倒置一次.
(可選):如果需要無RNA的基因組DNA,在樣品混合物中加入80毫升100毫克/毫升的核糖核酸酶A(未提供),在室溫下孵育10分鐘。
在樣品中加入10 ml乙醇(96~100%)。通過漩渦充分混合。如果出現沉淀物,就用噴入的方法打破它。
將FABG Maxi柱放置在50毫升離心管上(未提供)。并將15毫升的樣品混合物(添加乙醇)(包括任何沉淀物)仔細轉移到FABG Maxi柱。關上蓋子 4,000~6,000×g離心3 min。
一
英語字母表的第22個字母 1115
丟棄流道,將剩余的樣品混合物轉移到相同的FABG Maxi柱上.關閉蓋和離心機在4,000~6,000 x g,3分鐘,并丟棄流過.
8在FABG Maxi柱上加入4ml W1緩沖液(乙醇加乙醇)。關閉蓋子,在4,000~6,000×g離心3 min。丟棄流道,將fbg maxi柱放回50毫升。 離心管。
-確保乙醇在次打開時已加入W1緩沖液。
在FABG Maxi柱上加入7毫升的洗滌緩沖液(加入乙醇)。關閉蓋子,在4,000~6,000×g離心15 min。丟棄流道,將fbg maxi柱放回50毫升。 離心管。
--在次打開時,確保已將乙醇添加到清洗緩沖液中。
-重要的一步!確保離心后殘余液體被*除去??赡苄枰?0°C的真空烘箱中繼續干燥3英里。 lutes[人名] 盧茨
將FABG Maxi柱放入新的50毫升離心管中。(洗脫管,提供)
FABG Maxi柱膜中心加入0.75~1.5ml預熱洗脫緩沖液或ddH2O(pH7.5-9.0)。將FABG馬溪柱在室溫下放置5 min。
-重要的一步!若要進行有效洗脫,需在FABG Maxi柱上放置5分鐘,以確保洗脫緩沖液被柱膜*吸收。
-標準體積為0.75~1.5ml。如果需要更高的DNA產量,重復DNA排出步驟(步驟11),以提高DNA恢復。
4,000×g離心2分鐘,以逃避總DNA。
程序:(用于培養細胞DNA的提取)
將多達1x108個細胞轉移到50毫升離心管(未提供)。4,000~6,000 x g離心5 min,使細胞顆粒化。(如果使用貼壁細胞,則在Harv之前將細胞胰蛋白酶化。 besting1。[口]打敗,勝過( best的現在分詞 )
用10毫升PBS刺激細胞。
從第4步開始遵循血液協議。
發現并修理故障,解決紛爭
Possible reasons | Solutions |
Low or no yield of genomic DNA | |
Poor cell lysis | |
Poor cell lysis because of insufficient Proteinase K activity | Repeat the extraction procedure with a new sample. Use a fresh or well-stored Proteinase K stock solution. |
Poor cell lysis because of insufficient mixing with FABG buffer | Repeat the extraction procedure with a new sample. Mix the sample and FAGB Buffer immediately and thoroughly by pulse-vortexing. |
Poor cell lysis because of insufficient incubation time | Repeat the extraction procedure with a new sample. Extend the incubation time and make sure that no residual particulates remain. |
Ethanol is not added into the lysate before transfer- ring into FAGB Maxi Column | Repeat the extraction procedure with a new sample. |
Incorrect preparation of Wash Buffer | |
Ethanol is not added into W1 and Wash Buffer when first | Make sure that the correct volumes of ethanol (96- 100 %) is added into W1 and Wash Buffer when first open. Repeat the extraction procedure with a new sample. |
The volume or the percent- age of ethanol is not correct before adding into W1 and Wash Buffer | Make sure that the correct volumes of ethanol (96- 100 %) is added into W1 and Wash Buffer when first open. Repeat the extraction procedure with a new sample. |
Possible reasons | Solutions | ||||
Elution of genomic DNA is not efficient | |||||
pH of water elution is acidic | (ddH2O) | for | Make sure the pH between 7.5- 9.0. | of ddH2O | is |
Use Elution Buffer elution. | (provided) | for | |||
Elution Buffer or ddH2O is not completely absorbed by column membrane | After Elution Buffer or ddH2O is added, stand the FAGB Maxi Column for 5 min before centrifuga- | ||||
Column is clogged | |||||
Blood sample contains clots | Repeat the extraction procedure with a new sample. Mix the blood sample well with anti-coagulant to prevent formation of blood clots. | ||||
Sample is too viscous | Reduce the sample volume. | ||||
Degradation of elutated DNA | |||||
Sample is old | Always use fresh or well-stored sample for genomic DNA extraction. | ||||
Buffer for gel electrophoresis contaminated with DNase | Use fresh running buffer for gel electrophoresis. |
FABGK 000 | FavorPrep™血液/培養細胞基因組DNA提取迷你試劑盒 | 4個準備。 | 蛋白酶K粉末 | 在室溫(15~25℃)下保存2年。 |
FABGK 001 | 50個準備。 | |||
FABGK 001-1 | 100個準備。 | |||
FABGK 001-2 | 300個準備。 | |||
FABGK 100 | FavorPrep™血液/培養細胞基因組DNA提取迷你試劑盒 | 100個準備。 | RBC裂解緩沖液 FATL緩沖液 FABG緩沖液 W1緩沖液 洗滌緩沖液(濃) 洗脫緩沖液FABG迷你柱 2ml收集管 | 在室溫(15~25℃)下保存2年。 |
FABGK 300 | 300個準備。 |
FABGK 002-S | FavorPrep血液/培養細胞基因組DNA提取Midi試劑盒 | 2個準備。 | 蛋白酶K粉末 | 在室溫(15~25℃)下保存2年。 除蛋白酶K粉外,貯存于4℃。 |
FABGK 002 | 20個準備。 | |||
FABGK000-MAXI | FavorPrep™血液/培養細胞基因組DNA提取Maxi試劑盒 | 2個準備。 | Proteinase K Powder | 在室溫(15~25℃)下保存2年。 |
|
|
上海起發是實驗試劑一站式采購服務商
1:強大的進口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。
2:產品種類齊全,經營超過700多品牌,基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。
3:提供加急服務,貨品一般1-2周到貨。
4:富有競爭力的價格優勢,絕大部分價格有優勢。
5:多年積累良好的信譽,大部分客戶提供貨到付款服務??蛻舭ㄇ迦A、北大、交大、復旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、國藥、fisher等知藥企。
6:上海起發還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權代理。
7:我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批發,歡迎合作。
電話
QQ咨詢
4006551678